01 细胞转染概述及应用
细胞转染是一种将外源基因（如DNA、RNA）通过化学、生物或物理方法引入真核细胞的技术。这项技术在生物医学研究中具有重要意义，广泛应用于多个领域：
■ 研究基因功能：通过导入特定目标基因，实现其过表达，从而研究在高表达状态下对细胞功能的影响。同时，利用siRNA或shRNA使目标基因失活或降低表达，探讨基因缺失对细胞功能的影响。
■ 蛋白质表达与生产：通过转染编码目标蛋白的基因来进行蛋白质的表达和纯化，或融合荧光蛋白以研究目标蛋白在细胞内的分布或定位。
■ 细胞工程：通过转染和筛选，获得能够稳定表达外源基因的细胞系，即构建稳定转染细胞株。
■ 药物筛选与毒性测试：转染特定基因用于验证药物靶点的有效性，并通过高通量筛选寻找潜在药物。
■ 基因治疗：导入或修复基因用以治疗某些遗传病，也可以转染编码抗原基因进行疫苗研发。

02 细胞转染分类
Part 1：按导入核酸在宿主细胞的存在时间长短，细胞转染分为瞬时转染和稳定转染。
瞬时转染：外源基因能够表达，但不会整合到宿主细胞的基因组中，随着细胞分裂逐渐丢失。
稳定转染：外源基因能够整合到细胞基因组中，随细胞分裂持续表达，使得转染细胞的后代细胞也同样表达外源基因。
两者的主要区别在于：
目的不同：瞬时转染通常用于快速获得高水平的基因表达，而稳定转染则用于获得稳定表达目标基因的细胞株。
稳定性不同：瞬时转染由于基因未整合到染色体中，稳定性较差；而稳定转染则经过筛选，外源基因整合到染色体中，稳定性好。
方法不同：瞬时转染一般采用脂质体法，而稳定转染通常偏向于病毒转染或电转等方法。
筛选过程不同：瞬时转染后通常不需要筛选，而稳定转染则需要经过筛选，以挑选出外源基因成功整合的细胞。
质粒要求不同：瞬时转染的质粒不要求带有抗性，而稳定转染的质粒需要携带特定抗性以便于后续筛选克隆。
表达时效不同：瞬时转染的基因表达通常持续几天，不能稳定遗传，而稳定转染则能够长时间稳定表达目标基因。
实验周期不同：瞬时转染后细胞收集一般在24h-96h内完成，而稳定转染则需2-3周甚至3-4周筛选稳转细胞克隆。

Part 2：按照转染方法，细胞转染可分为物理介导法、化学介导法和生物介导法。
物理介导法：通过物理方法（如电穿孔法、显微注射法）直接将外源核酸导入细胞，通常不需要化学物质。这种方法效率较高，但对细胞损伤大，存活率低。
化学介导法：利用一些化学物质（如PEI、脂质体）改变细胞膜的物理和化学性质，使其对外源DNA或RNA具有亲和力，从而实现基因转移。这种方法操作简单，周期短，但大多数不能长期稳定表达外源基因。
生物介导法：通常利用病毒作为载体，将外源基因包装后导入细胞，如慢病毒、腺病毒、逆转录病毒。这种方法能够实现外源基因的长期稳定表达，并可进行高效、特异性的基因转移，但实验操作较为繁琐，周期较其他方法长。
综上所述，细胞转染方法多种多样，选择合适的方法依赖于实验需求、实验室条件、细胞类型和转染效率等因素。目前，大多数实验室常用化学介导的脂质体转染（质粒转染）和生物介导的慢病毒转染法。尊龙凯时专注于细胞转染技术的研究，为用户提供高质量的服务，帮助您快速实现研究目标。

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✔慢病毒转染服务：
服务编号 | 转染类别 | 实验目标 | 实验周期
SNTS-L001 | GFP稳转 | 获得GFP稳定表达的细胞 | 3-4周
SNTS-L002 | RFP稳转 | 获得RFP稳定表达的细胞 | 3-4周
SNTS-L003 | mCherry稳转 | 获得mCherry稳定表达的细胞 | 3-4周
SNTS-L004 | LUC稳转 | 获得LUC稳定表达的细胞 | 3-4周
SNTS-L005 | SV40永生 | 获得SV40永生化的细胞（主要为原代细胞） | 6-8周
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